一、血清的分離過程

1.  采血：首先，需要用適當的采血管（如凝膠促凝管或普通促凝管）采集志愿者或患者的全血。避免使用抗凝管，因為抗凝劑會影響血清的分離。

2.  靜置：采集完成后，將采血管在37℃溫箱中靜置30分鐘，待xue塊凝集。血液中的紅細胞和白細胞會聚集在一起形成xue塊。

3.  離心：將靜置后的采血管在離心機上離心。通常離心轉速為1000g（具體轉速需根據機型調整），離心時間為15分鐘。離心過程中，xue塊會被甩到離心管底部，而血清則位于xue塊上方。

4.  分離血清：用移液器小心地取出離心管中的血清，盡量避免觸及xue塊。將血清轉移到新的無菌容器中，即可進行后續實驗或其他操作。

5.  通過以上步驟，可以有效地將血清從全血中分離出來。需要注意的是，在分離血清的過程中，要盡量避免細菌污染，以保證實驗結果的準確性。

二、血清樣本的保存

1.  能夠應用ELISA 實驗的樣本種類很多，有血清，血漿，細胞上清，細胞裂解液，尿液，關節滑液，腦脊液，肺泡灌洗液，各種組織的組織勻漿﹔采集和處理的方式都不相同。

2.  ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的生長，其所排泄的一些酶也許會對抗原抗體等蛋白發生分化效果。樣本的長期保留，應在-70C以下。

3.  ELISA試劑盒血清標本是以無菌操作別離，則能夠在2~8C下保留一周，有菌操作，則主張冰凍保留。要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有相似過氧化物的活性。在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標本中止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有相似過氧化物的活性.在以HRP為符號酶血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相，然后與后邊加入的HRP底物反應顯色.

4.  冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的剪切將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用，從而引起假陰性結果。此外，凍融標本的混勻亦應注意，不要進行劇烈振蕩，反復顛倒混勻即可。

5.  在保存標本中如出現細菌污染所致的混濁或絮狀物時，應離心沉淀后取上清檢測.

三、血液樣本的放置時間對其檢驗結果的影響

1.  血糖（GLU）水平：應在采血后4小時內測定，因為隨著時間的延長，血糖水平可能會因血細胞的糖酵解作用而降低。

2.  血清鉀和血清氯水平：血清鉀在放置1小時后與即刻相比會明顯升高，而血清氯在放置5小時后會明顯下降。這表明血清電解質濃度會隨時間而改變，因此應在允許的留置時間內盡快送檢。

3.  血脂和脂蛋白：膽固醇等血脂成分在長時間貯存中可能會因脂蛋白顆粒結構的改變或裂解而受到影響，從而影響檢測結果的準確性。

4.  血清蛋白和酶活性：總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉肽酶（GGT）等指標在血液樣本長時間放置后，其測定結果往往會偏高。而尿素氮（BUN）和總膽紅素（TBIL）則可能偏低。

5.  乳酸濃度：在室溫下放置15分鐘后，乳酸濃度會明顯升高。在4℃條件下，乳酸濃度升高不明顯，但放置1小時后差異則有顯著意義。因此，采血后應立即檢測，或盡可能在規定時間內完成送檢。

6.  多項目檢測：如果要檢測多個項目，最好分別采集不同的血液樣本，以防止樣本間的污染。如果必須使用同一份樣本，則應注意檢測的順序，例如，*行PCR檢測再進行生化檢測，以避免生化檢測后的樣本污染影響PCR檢測結果。

7.  綜上所述，血液樣本的放置時間會對其檢驗結果產生多方面的影響。為了確保檢測結果的準確性和可靠性，應在規定的時間內完成采血、送檢和檢測工作。同時，還應考慮實驗室的溫度條件對樣本的影響，并采取適當的措施以確保樣本質量。